@article{oai:jumonji-u.repo.nii.ac.jp:00000670,
 author = {倉若, 美咲樹 and 佐々木, 菜穂 and 志村, 二三夫 and 山崎, 優子 and KURAWAKA, Misaki and SASAKI, Naho and SHIMURA, Fumio and YAMAZAKI, Yuko},
 journal = {十文字学園女子大学紀要, Bulletin of Jumonji University},
 month = {Feb},
 note = {グリコーゲンは動物界の貯蔵多糖であり，主に肝臓や骨格筋に存在する．その定量はグリコーゲン合成・分解に関わるメカニズムや調節を理解する上で重要な意味を持つ．従来汎用されてきたフェノール硫酸法やアンスロン硫酸法等は，化学反応に基づく比色法であり，特異性に難点があるとともに，感度が低く，培養細胞スケールの実験では多くの場合，検出限界以下となる．そこで本研究では，グリコーゲンをグルコース単位で分解する酵素であるグルコアミラーゼと蛍光原基質10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazineを用いて高感度にグリコーゲンの定量ができるよう酵素蛍光法を検討し，本法の定量可能レンジと検量線の直線性を調べた．その結果，グリコーゲン標準液0.1-20 µg/mLまで良好な直線性が得られた．また，マイクロプレート対応蛍光分光光度計の代用としてリアルタイム定量PCRシステムで定量することも可能であった（定量範囲：0.1-2 µg/mL）．続いて，実際に培養肝細胞HepG2を用い，培養液中のグルコースの有無，グリコーゲン枯渇状態からのグルコース添加による細胞内グリコーゲン量の回復過程を本法により定量した．その結果，培養液中のグルコースの有無による細胞内グリコーゲン量の消長を本法により検出することができた．以上より，本研究の酵素蛍光法は，グリコーゲンを高感度に定量でき，培養細胞スケールのグリコーゲン量の増減を検出することが可能であると結論された．},
 pages = {83--94},
 title = {培養細胞内グリコーゲンの定量のための酵素蛍光法の検討},
 volume = {49},
 year = {2019},
 yomi = {クラワカ, ミサキ and ササキ, ナホ and シムラ, フミオ and ヤマザキ, ユウコ}
}